ⅠNwaikawa ucleiciwhakataki
Ka wehewehea te waikawa nucleic ki te waikawa deoxyribonucleic (DNA) me te waikawa ribonucleic (RNA), i roto i enei ka wehewehea te RNA ki te RNA ribosom (rRNA), te RNA karere (mRNA) me te whakawhiti i te RNA (tRNA) kia rite ki ana mahi rereke.Ko te nuinga o te DNA kei roto i te karihi, te mitochondria me te chloroform, ko te RNA te nuinga o te tohatoha i roto i te cytoplasm.Ko te takenga o te whakaputanga ira, he mahi tino nui te tangohanga waikawa karihi i roto i te rangahau koiora rapoi me te tātaritanga rapoi haumanu.Ko te kukū me te ma o te tangohanga waikawa karihi ka pa tika ki te PCR o muri mai, te raupapatanga, te hanga vector, te nakunakunga enzyme me etahi atu whakamatautau.
Ⅱ Te tangohanga waikawa nucleic me te tikanga purenga
① Tikanga tangohanga Phenol/chloroform
Ko te tangohanga Phenol/chloroform he tikanga puāwaitanga mo te tangohanga DNA, ko te nuinga o te whakamahi e rua nga momo whakarewa pararopi hei rongoa i nga tauira, te whakakore i te waikawa nucleic i runga i te DNA i roto i te waahanga wai, nga ngutu i roto i te waahanga waro, me nga pūmua i waenganui i nga wahanga e rua.Ko tenei tikanga he painga o te utu iti, te maamaa me te painga pai.Ko nga ngoikoretanga he mahi uaua me te wa roa.
② Tikanga Trizol
Ko te tikanga Trizol he tikanga puāwaitanga mo te tangohanga RNA.Ko te tikanga Trizol ka wehea ki te waahi wai me te waahi waro i muri i te centrifugation me te chloroform, i te mea ka rewa te RNA i roto i te waahanga wai, ka whakawhitia te waahanga wai ki te ngongo EP hou, ka whiwhi te ua i muri i te taapiri i te isopropanol, katahi ka purea te waihano.He pai tenei tikanga mo te tangohanga RNA mai i nga kopa kararehe, nga pūtau me nga huakita.
③ Tikanga purenga tīwae centrifugal
Ka taea e te tikanga purenga pouwaenga Centrifuge te whakauru i te DNA na roto i nga rauemi whakahiato matrix matrix motuhake, ka taea e te RNA me te pūmua te haere marie, katahi ka whakamahi te tote teitei PH iti ki te whakakotahi i te waikawa karihi, te tote iti te uara PH teitei hei wehe me te pure i te waikawa karihi.Ko nga painga ko te kukū purenga teitei, te pumau nui, kaore he hiahia mo te whakarewa pararopi, me te utu iti.Ko te ngoikoretanga ko te mea me centrifuged ia taahiraa i te taahiraa, kia nui ake nga waahanga mahi.
④ Tikanga pirepire aukume
Ko te tikanga o nga pirepire autō he wehe i te tauira kiko pūtau i roto i te lysate, ka tuku i te waikawa karihi i roto i te tauira, katahi ka whakaemihia nga ngota ngota waikawa nucleic ki runga i te mata o te pirepire autō, ka waiho nga poke penei i te pūmua me te huka ki roto. te wai.Na roto i nga hikoinga o te wehenga kiko pūtau, ka herea te pirepire autō ki te waikawa karihi, te horoi o te waikawa karihi, te hauhanga waikawa karihi, me etahi atu, ka whiwhi te waikawa karihi parakore.Ko nga painga ko te mahi ngawari me te whakamahi i te wa poto, me te kore e hiahiatia te centrifugation taahiraa.He iti nga whakaritenga hangarau ka taea te mohio ki te mahi aunoa me te mahi papatipu.Ko te huinga motuhake o te pirepire autō me te waikawa karihi ka hanga te waikawa karihi i tangohia me te kukū teitei me te parakore.Ko te kino ko te utu o te maakete o naianei he ahua utu nui.
⑤ Ētahi atu tikanga
I tua atu i nga tikanga e wha i runga ake nei, kei reira te pupuhi koropuke, te tikanga tote kukū, te tikanga horoi anionic, te tikanga ultrasonic me te tikanga enzymatic, etc.
Ⅲ Te momo tangohanga waikawa karihi
Kei a Foregene te tüäpapa Direct PCR matua o te ao, tüäpapa RNA Isolation pou-rua (DNA-anake + RNA anake ).Ko nga hua matua ko nga kete wehe DNA/RNA, PCR me te PCR Direct PCR reagents reagents taiwhanga taiwhanga raupapa.
① Tapeke RNA tangohanga
Ko nga tauira tangohanga RNA katoa ko te toto, nga pūtau, nga kopa kararehe, nga tipu, nga huaketo, me etahi atu. Ko te maatanga teitei me te nui o te RNA katoa ka taea te whiwhi ma te tangohanga RNA katoa, ka taea te whakamahi i roto i te RT-PCR, te tātari maramara, te whakamaoritanga in vitro, te whakakao ngota, Dot Blot me etahi atu whakamatautau.
Foregene relatedRNA Wehewehenga Kete
Kararehe Tapeke RNA Isolation Kit--He tere me te whai hua te tango i te RNA katoa o te parakore me te kounga teitei mai i nga momo kopa kararehe.
Pūtau Tapeke RNA Wehewehenga Kete--Ka taea te whiwhi RNA tapeke tino purea me te kounga teitei mai i nga momo momo tipu i roto i te 11 meneti.
Tipu Tapeke RNA Wehewehenga Kete--Kia tere te tango i te RNA katoa o te kounga teitei mai i nga tauira tipu me te iti o te polysaccharide me te polyphenol.
Kete Wehenga RNA Viral--Ka tere te wehe me te pure i te RNA viral mai i nga tauira penei i te plasma, serum, nga wai-kore-kore o te tinana me nga supernatants ahurea pūtau.
② Tangohanga DNA genomic
Ko nga tauira tangohanga DNA Genomic ko te oneone, te tai, te toto, nga pūtau, te kopa kararehe, nga tipu, nga wheori, me etahi atu. Ka taea te tangohanga DNA Genomic ki te nakunaku whākōkī, te hanga whare pukapuka DNA, PCR, te whakarite antibody, te wetewete o te Western blot hybridization, te maramara ira, teitei - te raupapatanga o nga mahi me etahi atu whakamatautau.
Foregene relatedNga Kete Motuhake DNA
Kopa Kararehe DNA Kete Wetewete--Te tango tere me te purenga o te DNA genomic mai i nga puna maha, penei i nga kopa kararehe, nga pūtau, aha atu.
Toto DNA Midi Kit (1-5ml)--Ka tere te pure i te DNA genomic-kounga teitei mai i te toto anticoagulated (1-5ml).
Kete Wetewete DNA Puccal Swab/FTA Card--Hohoro te purei i te DNA ira tangata-kounga teitei mai i nga tauira Kaari Kaari Buccal/FTA.
Te Kete Motuhake ADN Whakatipu--Kia tere te pure me te tiki i te DNA genomic kounga teitei mai i nga tauira tipu (tae atu ki nga polysaccharides me nga tauira tipu polyphenol)
③ Te tangohanga plasmid
Ko te Plasmid he momo DNA ngota iti porohita i roto i nga pūtau, he kawe noa mo te whakakotahitanga DNA.Ko te tikanga o te tangohanga plasmid ko te tango i te RNA, te wehe i te plasmid mai i te DNA genomic huakita, me te tango i te pūmua me etahi atu poke kia whiwhi plasmid tino parakore.
General Plasmid Mini Kit--Kia tere te pure i te DNA plasmid kounga teitei mai i nga huakita kua huri mo nga whakamatautau koiora irapoi rite tonu ki te hurihanga me te nakunaku whākōkī.
④ Ko etahi atu momo tangohanga, tangohanga miRNA, aha atu.
Kararehe miRNA Kete Wehewehenga--Te tango tere me te kaha ki te tango i nga kongakonga RNA iti o te 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA mai i nga momo kopa kararehe me nga pūtau.
Ⅳ Nga whakaritenga mo te tangohanga waikawa karihi me te hua purengas
① Hei whakarite i te tika o te hanganga tuatahi o te waikawa karihi.
② Whakaitihia te pokanoa o te pūmua, te huka, te lipids me etahi atu macromolecules
③ Kaua rawa he whakarewa pararopi, he kukū teitei o nga katote whakarewa ka taea te aukati i te whākōkī i roto i ngā tauira waikawa karihi.
④ Ko te RNA me etahi atu mate waikawa karihi me whakakore i te wa e tango ana i te DNA, me te rereke.
Te wa tuku: Noema-24-2022
